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浮游菌采样器的采样和培养

点击次数:151  发布时间:2023-08-03
   1、工作原理
  微生物采样器利用安德森采样器,在一定的流量条件下对空气中悬浮的微生物颗粒进行采样,通过改变孔径的方法将不同粒径的颗粒物进行六级分离,达到对一定体积的气体中所有生物活性颗粒物采集的目的。安德森原理中没有指明每一级分别采什么菌,但却给出了每一级所能捕获的颗粒的粒径范围。一般情况下,空气流入采样器的横截面积是固定的,流量与流速是成线性正比的关系。依据安德森原理,空气中的颗粒进入采样器,只有流速乘以颗粒的质量值足够大,大于培养基表面气垫阻力乘以受阻时间值时,该微生物颗粒才能吸附在培养基上,否则被风机抽走并排出采样器。
  所以撞击头的设计就成为了关键,这个孔开大开小,长条形还是圆形甚至五角形都是可以的,孔洞式与狭缝式除了现状上的区别,理论上没有其他区别,但是他们都必须要通过第三方的实验室验证捕获率,通常捕获率在90%-110%之间,都算合格的。
  2、工作过程
  (1)在有平台的洁净室内编制培养皿(XX洁净室,XX测点),操作前应用浸湿75%乙醇的医用脱脂棉花擦拭平台。测试人员双手用同样方法严格消毒。在编制过程中再次仔细检查培养基平皿的质量,有变质、破损或污染不能使用。
  (2)用浸湿75%乙醇的医用脱脂棉花擦拭采样器的采样口,采样管、采样器的项盖,转盘及罩子内外表面。
  (3)采样器经消毒后不放入培养皿,启动仪器空转运行不少于5 min,使仪器中的残余消毒剂蒸发。
  (4)根据被测地点的洁净度设定采样量,采样器的流量(L/min)X采样时间(min)=采样量(L)。
  (5)采样操作时,培养皿应轻拿轻放,用“五指抓拿”培养皿外径,尽量避免人为对样本造成污染。
  (6)根据被测地点的面积确定采样点的布置及采样点数量。
  3、浮游菌采样器的使用注意事项
  (1)采样器应该充分清洁灭菌。如果清洁灭菌不充分,浮游细菌采样器上的细菌脱落飞扬,就有可能增加采到的细菌数量,测定结果可能出现巨大的误差。
  常用的灭菌方法有两种,(1)使用75%乙醇对一台采样器每一级撞击板的表面和背面,以及撞击板周边密封圈和进气口等部位进行擦拭消毒。
  (2)使用高压蒸汽灭菌采样器取下密封圈,每一级独立包装后使用压
  力蒸汽灭菌器在102.9Kpa,121℃条件下高压灭菌30min。
  (2)正确调节喷射距离。气体喷射器狭缝到培养基的距离关系到细菌撞击培养基的力度。距离较近,撞击培养基的力度较大;距离较远,撞击培养基的力度较小。采样前应将喷射距离调节到标准量值。
  (3)将流量调节到标准量值。气体的流量关系到气体的喷射速度。速度过大则撞击的力度也大,速度过小则撞击的力度也小,所以采样前应将流量调节到标准量值。由于采样头的多孔结果尺寸固定,如果采样器流量达不到设定值,则撞击速度将发生偏离,采集到浮游菌就有偏差。因此,采样流量是浮游菌采样器的重要指标。一般采用流量计对浮游菌采样器的泵体流量进行校准测试。
  (4)根据细菌浓度选取采样时间。采入培养皿中的细菌数决定培养皿中细菌的密度。密度过小,统计到的细菌个数较少,统计误差较大;密度过大,容易相互重叠,产生漏计误差。所以培养皿中细菌的密度应适中。在气体中细菌的浓度固定、气体的流量固定的情况下,采样的时间越长,培养皿中细菌的密度越大;采样的时间越短,培养皿中细菌的密度越小。
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